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核酸檢測的原理到底是什么?為什么會出現(xiàn)假陰性?

時間:2021-08-10 11:02來源:未知 作者:admin 點擊:
新冠疫情發(fā)生以來,核酸檢測成為了一個高頻詞,核酸檢測陽性是確診新冠肺炎的重要標準。核酸檢測的原理到底是什么?核酸檢測為什么會出現(xiàn)假陰性?除了核酸檢測,還有哪些技術(shù)可以檢測新冠病毒呢?
新冠疫情發(fā)生以來,核酸檢測成為了一個高頻詞,核酸檢測陽性是確診新冠肺炎的重要標準。核酸檢測的原理到底是什么?核酸檢測為什么會出現(xiàn)假陰性?除了核酸檢測,還有哪些技術(shù)可以檢測新冠病毒呢?
 
01
 
揭秘新冠病毒核酸檢測原理
 
核酸檢測其實是檢測受測者體內(nèi)是否有新冠病毒的核酸(RNA)。每種病毒的核酸內(nèi)部都含有核糖核苷酸,不同的病毒所含的核糖核苷酸數(shù)量和排列順序不同,使得每種病毒都具有特異性。
 
新冠病毒的核酸也是獨特的,核酸檢測就是對新冠病毒的核酸進行特異性檢測。在進行核酸檢測之前,需要采集受測者的痰液、咽拭子、肺泡灌洗液、血液等樣本,對這些樣本進行檢測,就可以發(fā)現(xiàn)受測者的呼吸道感染了什么病菌。新冠病毒核酸檢測常用的是咽拭子樣本檢測,將樣本裂解提純,從中提取出可能存在的新冠病毒核酸,檢測的準備工作就做好了。
 
核酸檢測的原理
 
新冠病毒核酸檢測主要用熒光定量RT-PCR技術(shù),這種技術(shù)是熒光定量PCR技術(shù)與RT-PCR技術(shù)的結(jié)合。在檢測過程中,先采用RT-PCR技術(shù)將新冠病毒的核酸(RNA)逆轉(zhuǎn)錄為對應(yīng)的脫氧核糖核酸(DNA);再采用熒光定量PCR技術(shù),將得到的DNA進行大量復(fù)制,同時,使用特異性探針對復(fù)制得到的DNA進行檢測,打上標記。如果存在新冠病毒核酸,儀器就可以檢測到熒光信號,而且,隨著DNA的不斷復(fù)制,熒光信號不斷增強,這樣就間接檢測到了新冠病毒的存在。
 
 
 
(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))
 
02
 
為什么會出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象
 
假陰性,就是指被檢測者已經(jīng)感染了新冠病毒,但是卻沒有檢測出病毒核酸,即核酸檢測為陰性。如果一個受測者沒有出現(xiàn)相關(guān)癥狀,核酸檢測又為陰性,就很容易讓他放松警惕,可能帶來更大范圍的病毒傳播,這也是新冠病毒的狡猾之處。
 
出現(xiàn)假陰性的原因主要有以下三方面:
 
第一,原始檢測標本中新冠病毒核酸含量過低,低于能被檢測到的下限。這與所采集樣本的類型和采集的時機等都有關(guān)系。
 
第二,如果新冠病毒核酸與探針結(jié)合的部位發(fā)生變異,可能影響檢測中探針的結(jié)合效率,導(dǎo)致熒光信號檢測不到。
 
第三,假陰性也和檢測技術(shù)的靈敏度有關(guān)。疫情發(fā)生初期,應(yīng)用于臨床的試劑盒不夠成熟、靈敏度不夠高,關(guān)于假陰性的報道頻出。后來,隨著技術(shù)水平的提高,檢測的準確率迅速提高,假陰性率不斷降低。
 
03
 
核酸檢測為陽性就是確診了嗎
 
核酸檢測結(jié)果呈陽性,就可以確認受測者上呼吸道存在病毒核酸,但并不能直接確診為新冠肺炎患者。在核酸檢測為陽性的情況下,還要綜合流行病學(xué)史對受測者進行進一步的診斷,如果受測者還有發(fā)熱、咽痛、咳嗽、乏力等癥狀,以及與已確診的感染者有接觸史等,就可以診斷為確診病例。
 
如果受測者沒有任何相關(guān)癥狀,一般診斷為無癥狀感染者。無癥狀感染者也有傳染性,而且一些無癥狀感染者后來也開始出現(xiàn)癥狀,變成了確診患者。
 
04
 
其他檢測新冠病毒的技術(shù)
 
對受測者來說,從標本中分離出病毒是最權(quán)威的確診依據(jù),但是,分離病毒是比較危險的操作,需要在高防護級別的實驗室中進行,而且耗時比較長、成本較高。一般醫(yī)療機構(gòu)不具備這個條件,他們大多會采取檢測血液中是否有病毒抗體的方法,來判斷受測者是否感染了病毒,乙肝、艾滋病等都是通過這種方式進行檢測的。
 
新冠病毒也可以通過這種免疫學(xué)檢測的方法檢測出來。面對新冠病毒的入侵,人體會進行“反抗”,產(chǎn)生特異性抗體IgM和IgG(免疫球蛋白M和免疫球蛋白G)。如果在受測者血液中檢測出這兩種特異性抗體,就可以說明受測者感染了新冠病毒。
 
怎么檢測抗體呢?常用的是化學(xué)發(fā)光免疫分析法,也就是使用化學(xué)發(fā)光劑或特定的酶標記抗體或抗原,發(fā)生免疫反應(yīng)形成復(fù)合物,洗滌后再加入發(fā)光劑,如果受測者血液中存在IgM和IgG這兩種特異性抗體,化學(xué)發(fā)光儀就能檢測到發(fā)光信號。這種化學(xué)發(fā)光免疫分析法,是目前最先進的免疫檢測技術(shù)之一。它靈敏度高、特異性強、檢測范圍寬、出結(jié)果快,但檢測成本較高。
 
此外,由于人體感染病毒后需要一定時間才能產(chǎn)生抗體,只有等抗體產(chǎn)生后才能檢測到,這也導(dǎo)致抗體檢測的時效性不強。乙肝、艾滋病等感染后需要2~3周才能產(chǎn)生抗體。新冠病毒感染后需要3天以上才能檢測到IgM抗體,需要一周以上才能檢測到IgG抗體。
 
所以,為了盡快抓住新冠病毒的尾巴,應(yīng)用更多的是核酸檢測,它可以更早發(fā)現(xiàn)新冠病毒的蹤跡。
 
(本文來自:中國數(shù)字科技館,原題《核酸檢測的原理到底是什么?為什么會出現(xiàn)假陰性?》)
(責(zé)任編輯:admin)
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